從人體血漿中提取酸性化合物的簡便方式

*，制藥領域中許多生物分析化合物都是堿性的，可以通過疏水性或陽離子交換吸附劑輕易地提取。不過，降脂他汀類和抗炎藥卻大多是酸性的。使用傳統的疏水性方法無法提取這些酸性化學物。因此，安捷倫開發出一種命名為Bond Elut Plexa PAX的新型聚合物強陰離子交換填料，專門用于簡化該提取過程。

圖 1. 使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 從血漿中提取酸性藥物。（放大 圖片）

簡單通用的提取方法

我們開發了一種簡單通用的方法，使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性化合物。為了評估該方法的性能，我們測定了吸附劑床的分析物回收率、提取樣品響應的線性以及加標血漿樣品分析的準確性和度。

由于方法的驗證過程非常耗時并且需要準確度*的數據，因此只有速度快、回收率好、重現性高的固相萃取（SPE）方法才能令人滿意。如果能對 SPE 過程進行優化且不損害數據完整性，便能夠簡化和縮短方法的驗證過程。Bond Elut Plexa 系列采用通用的方法，zui大程度縮減方法開發過程，同時還提高了分析靈敏度和重現性。

簡便的流程

我們使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 96 孔板和2% NH₄OH 、5% 甲酸進行提取。圖 1 顯示了提取流程。將所有樣品蒸干，接著使用5 mM 80:20 的甲酸銨: CH₃OH 水溶液定容至 100 µL。然后在安捷倫 325-MS LC/MS（采用 vESI 離子源）儀器上進行液相色譜/質譜分析。

可重現的回收率

我們通過測定分析物響應并將其與加標流動相標準品進行比較來計算回收率。由于提取效率低、離子抑制效應或未洗脫導致的分析物損耗均會體現在回收率上。盡管一些回收率在 50% 至 60% 的范圍內，但響應是線性的，因為方法的曲線線性良好，準確性高。所有藥物的回收率均高于 50%，且重現性良好，相對標準偏差（RSD）低于 7%（表 1）。

藥物 回收率 % % RSD （n=6） 阿托伐他汀 62 4.4 雙氯芬酸 52 3.7 速尿 96 6.1 酮基布洛芬 67 2.3 普伐他汀 95 3.4
表 1.安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性藥物的回收率。		圖 2.安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性藥物的回收線性良好。 （放大 圖片）		圖 3. 安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 從人體血漿中提取的 50 ng/mL 樣品的色譜分析結果。（放大 圖片）

從 0.5 到 200 ng/mL 的線性良好（圖 2）.選擇 50 ng/mL 的中點濃度測定校正曲線的準確度 （表 2）. zui后， 圖 3 顯示的樣品色譜結果展示了該方法有效性。

表 2. 校正曲線的準確度。

Bond Elut Plexa PAX ——獲得較高回收率的簡便方法

上述結果表明，安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 使用此簡便方法提取酸性化合物異常簡單。更好的是，該吸附劑對所有化合物都能提供較高的回收率，人體血漿中 0.5 至 200 ng/mL 的藥物樣品能夠獲得良好的線性。此外，校正曲線也呈線性，一階線性回歸的相關系數均大于 0.995。對于所有化合物而言，該方法準確性高，重現性好，大多數結果都在實際值的 ±10% 以內，RSD 低于 15%。

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